Оценка клональности эпителиотропной Т-клеточной лимфомы собак разной анатомической локализации

Предпосылки. Полагают, что эпителиотропная кожная Т-клеточная лимфома собак (эКТКЛ) представляет собой заболевание, гомологичное фунгоидной гранулеме (ФГ) у человека. При ФГ у людей опухолевые клетки фенотипически соответствуют резидентным эффекторным Т-клеткам памяти, популяции, сохраняющейся в тканях длительное время без циркуляции. У собак с эКТКЛ часто появляются очаги в разных местах, что вызывает вопрос, происходит ли новообразование из одной субпопуляции Т-клеток или нет.
Цели. Описать перестройки гена антигенного рецептора лимфоцитов из кожи и крови собак с эКТКЛ, чтобы установить, идентичны ли клоны опухоли.
Животные. 14 собак с эКТКЛ.
Материалы и методы. Гистологическое и иммуногистохимическое исследование, ПЦР для обнаружения перестройки антигенного рецептора (PARR) Т-клеточного рецептора гамма (TRG) различных биоптатов кожи и крови.
Результаты. Все биоптаты кожи содержали неопластические лимфоциты, содержащие кластер дифференциации (CD)3. У отдельных собак все биоптаты кожи показали идентичные профили клональности TRG, что дает основания предполагать присутствие одного опухолевого клона во всех очагах. В крови соответствующий клон обнаружен у 6 из 14 собак, уникальный клон выявлен у 9 из 14 собак, и у 2 из 14 не было обнаружено клона.
Выводы. Эти данные показывают, что очаги эКТКЛ собак в нескольких локализациях содержат один клон опухоли, неопластические лимфоциты не остаются неподвижно в коже, а могут циркулировать в крови, в коже и крови можно обнаружить различающиеся клоны, и циркулирующие неопластические клетки не обязательно сопровождаются лимфоцитозом.
Ключевые слова: эпителиотропная кожная Т-клеточная лимфома, собаки, клональность опухоли, перестройка
гена антигенного рецептора лимфоцитов

Введение
Эпителиотропная кожная Т-клеточная лимфома — неоднородная группа опухолевых заболеваний кожи у людей и собак.
Фунгоидная гранулема — самый распространенный подтип эКТКЛ у людей. ФГ проявляется эритематозными пятнами, которые могут прогрессировать до бляшек и опухолей, и гистологически характеризуется эпителиотропными инфильтратами атипичных лимфоцитов с разной степенью инфильтрации дермы [1].
Педжетоидный ретикулез — вариант ФГ с атипичными лимфоцитами, ограниченными эпителием.
Синдром Сезари — редкая форма кожной Т-клеточной лимфомы, характеризующаяся поражением кожи и лимфатических узлов и лейкемическим компонентом.
В целом, ФГ и ПР у людей считаются доброкачественными лимфомами, ограниченными кожей, которые обычно благоприятно отвечают на лечение, воздействующее на кожу, и часто характеризуются длительным и незаметным клиническим течением. Клиническое течение СС обычно агрессивное, он устойчив к различным способам лечения [1…4].
У собак описаны подтипы эКТКЛ, сходные с человеческим ФГ, ПР и СС, с различиями в клиническом течении и иммунофенотипе [5…7]. эКТКЛ собак обычно проявляется как многоочаговое заболевание с быстрым клиническим прогрессированием. Неопластические клетки при эКТКЛ собак представляют собой клетки (CD)8+ или CD4- CD8-, и значительный процент экспрессирует Т-клеточный рецептор (TCR) y5 [5, 8]. Это коррелирует с ФГ человека, при котором неопластические Т-клетки экспрессируют CD4 и TCR γδ [4]. Исторически у людей ФГ и СС считали вариантами одного заболевания; однако фенотипические характеристики, молекулярные профили и ответы на терапию дают основания полагать, что это отдельные заболевания, происходящие из разных субпопуляций эффекторных Т-клеток памяти [1, 2, 9].
Среди Т-клеток кожи выделяют циркулирующие и резидентные закрепляющиеся в тканях популяции [9]. Постоянные Т-клетки памяти (TRM) длительно сохраняются в коже, не рециркулируют и экспрессируют кожные аддрессины CCR4 и кожный лимфоцитарный антиген (CLA), и лишены других рецепторов хоминга [9, 10]. В противоположность этому, центральные Т-клетки памяти циркулируют между кровью и лимфатическими узлами, а также экспрессируют адрессины, обусловливающие хоминг в кожу, могут входить и рециркулировать через кожу. Неопластические клетки из ФГ человека обладают фенотипом тканевых клеток памяти, тогда как неопластические клетки пациентов с СС (в крови или коже) обладают фенотипом центральных клеток памяти [2, 10]. В целом клиническое течение у пациентов с указанными характеристиками отражает биологию данных субпопуляций Т-клеток памяти. Однако имеются некоторые несоответствия, например возникает вопрос, почему эКТКЛ обычно проявляется в нескольких анатомических локализациях, хотя полагают, что клетки TRM остаются закрепленными в коже.
Многие из доступных маркеров для описания характеристик Т-клеток у людей и мышей недоступны для использования в тканях собак. Это ограничивает возможности описания характеристик эКТКЛ собак. Однако данные о биологии эКТКЛ возможно получить с помощью ИГХ-методов с использованием маркеров и молекулярных инструментов, доступных для собак, прежде всего ПЦР для определения перестроек рецепторов (PARR), что позволяет определить клональные взаимоотношения клеток в разных анатомических участках...