К возможности определения белка в преломляющих средах глазного яблока крупного рогатого скота

В.М. Холод, доктор биологических наук, профессор кафедры химии;
В.П. Баран, кандидат биологических наук, доцент кафедры химии;
А.В. Бизунов, старший преподаватель кафедры химии.
УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» (Республика Беларусь, Витебск)

Проведено экспериментальное сравнение основных методов количественного определения общего белка в таких преломляющих средах глазного яблока крупного рогатого скота, как хрусталик, стекловидное тело, внутриглазная жидкость.
Наилучшие результаты показывает метод Бредфорда. Он отличается высокой чувствительностью, воспроизводимостью и позволяет определять концентрацию общего белка при его низком содержании. Спектрофотометрический метод уступает по селективности и чувствительности методу Бредфорда, но может быть использован при исследовании белка в стекловидном теле и внутриглазной жидкости. Биуретовый метод наименее чувствителен и может быть использован только при исследовании общего белка в безъядерной части хрусталика, отличающейся высоким содержанием белка, сопоставимым с его содержанием в сыворотке крови.

Ключевые слова: крупный рогатый скот, глазное яблоко, стекловидное тело, внутриглазная жидкость, хрусталик, общий белок.


To the possibility of protein determining in refractive media od cattle eye-bulb

V.M. Kholod, Grand PhD in Biological Sciences, Professor of Department of chemistry;
V.P. Baran, PhD in Biological Science, Assistant professor of Department of chemistry;
A.V. Bizunov, senior lecture of Department of chemistry (bizunov.andrei@yandex.by).
Vitebsk State Academy of Veterinary Medicine (210026, Republic of Belarus, Vitebsk, 1 st. Dovator 7/11).

An experimental comparison of the main methods of quantitative determination of total protein in such refractive media of the eyeball of cattle as the crystalline lens, vitreous body, intraocular fluid was carried out.
The Bradford method shows the best results. It is characterized by high sensitivity, reproductivity and allows determining the total protein at its low content.
The spectrophotometric method is inferior in selectivity and sensitivity to the Bradford method, but it can be used in the study of protein in the vitreous and intraocular fluid.
The biuretic method is the least sensitive and can be used only in the study of total protein in the nuclear-free part of the lens, characterized by a high protein content comparable to its content in blood serum.

Key words: cattle, eye-bulb, vitreous, intraocular fluid, lens, total protein.


Введение
Определение содержания белка в органах и тканях животных — метод, который используют при диагностике различных патологий, функциональной характеристике органов и тканей и при изучении патогенеза заболеваний. Это широко распространенный тест, как в экспериментальной, так и в клинической биохимии. Наиболее часто объектом анализа служит сыворотка крови, а метод определения выбирают самый распространенный — биуретовый: простой в выполнении, не требующий сложных реактивов, легко поддающийся автоматизации — он нашел широкое применение в биохимических исследованиях. Однако данный метод характеризуется относительно низкой чувствительностью. При исследовании биологических жидкостей с низким содержанием белка биуретовый метод становится малоэффективным или вообще не пригодным для точных количественных определений. Поэтому наряду с биуретовым методом определения белка используют ряд других, более чувствительных: спектрофотометрический, метод Лоури, метод Бредфорда. В основе этих методов лежат особенности химической структуры, состава и свойств белков, которые функционально связаны с их количественным содержанием...